? ? ? ?ZL-620C信息化集成化信號采集處理系統的功能多樣性允許一套系統用于多種生命科學的研究,直觀而功能強大的軟件,可以幫助研究人員得到更多的,根據實驗記錄得到數據之外的數據。ZL-620C信號采集處理系統作為一臺先進的儀器,改變了許多實驗的實驗技術、方法和步驟,其作用不但在生命科學的研究方面得以體現,并為廣大科研工作者所接受,使得學生創新思維及動手能力的培養得到很大程度的提高。 ? ? ??
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? ? ??【心室期前收縮與代償間歇及不應期的測定】
【實驗目的】???
?本實驗通過觀察在心臟活動的不同時期給予刺激,以驗證心肌的興奮性周期性變化的特征。
【實驗原理】
心肌每興奮一次,其興奮性就發生一次周期性的變化。心肌興奮性的特點在于其有效不應期特別長,約相當于整個收縮期和舒張早期。因此,在心臟的收縮期和舒張早期內,任何刺激均不能引起心肌興奮而收縮,但在舒張早期以后,一次較強的閾上刺激就可以在正常節律性興奮到達以前,產生一次提前出現的興奮和收縮,稱之為期前收縮。同理,期前收縮也有不應期。因此,如果下一次正常的竇性節律性興奮到達時正好落在期前收縮的有效不應期內,便不能引起心肌興奮和收縮。這樣,在期前收縮之后就會出現一個較長的舒張期,這就是代償間歇。
【實驗對象】
? ? 蟾蜍。
【實驗器材】
蛙類解剖手術器材、蛙釘、蛙板、林格液、鐵支架、張力換能器、培養皿、滴管、蛙心夾、微調固定器、刺激電極、ZL-620C集成化信息化信號采集處理系統。
【方法和步驟】
1.?蟾蜍心室期前收縮與代償間歇的觀察
(1)?蛙心標本:可采用在體蛙心標本或離體蛙心標本。在體蛙心標本制作簡易,但離體蛙心標本實驗結果較典型。1)?在體蛙心標本:①取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓,將其仰臥固定于蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開(或剪掉),然后剪掉胸骨,打開心包,暴露心臟。②將與張力換能器有連線的蛙心夾在心室舒張期夾住心尖。將刺激電極固定,使其兩極與心室相接觸。③按圖1連接線路,張力換能器接ZL-620C第一通道(亦可選擇其他通道)。刺激電極與心室接觸良好,連接ZL-620C刺激輸出。
2)?離體蛙心標本:離體蛙心標本的制備見"離體蛙心灌流"實驗。將與張力換能器有連線的蛙心夾經滑輪在心室舒張期夾住心尖。將刺激電極固定,使其兩極與心室相接觸。按圖2連接線路,張力換能器接ZL-620C第一通道(亦可選擇其他通道)。刺激電極與心室接觸良好,連接ZL-620C刺激輸出。
(2)?打開計算機,啟動ZL-620C集成化信息化信號采集處理系統。點擊ZL-620C菜單“實驗/常用生理學實驗”,選擇“期前收縮與代償間歇”。ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數如表1所示。
(3)?實驗觀察
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?圖2-11-1??在體蛙心期前收縮實驗儀器連接方法
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?圖2??離體蛙心期前收縮實驗儀器連接方法
1)?描記正常蛙心的搏動曲線,觀察曲線的收縮相和舒張相。
2)?用中等強度的單個閾上刺激分別在心室收縮期和舒張早期刺激心室,觀察能否引起期前收縮。
3)?用同等強度的刺激在心室舒張早期之后刺激心室,觀察有無期前收縮的出現。表1??ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數
采樣參數刺激器參數顯示方式記錄儀刺激模式單刺激采樣間隔2ms延時1msX軸顯示壓縮比50:1波寬1~5ms通道通道1通道4幅度3~5VDC/ACDC記錄刺激標記?處理名稱張力刺激標記放大倍數50~1005~50Y軸壓縮比4:164:1
4)?刺激如能引起期前收縮,觀察其后是否出現代償間歇(圖3)。

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?圖3?? 期前收縮和代償間歇注:箭頭表示給予刺激
?2.心肌有效不應期的測定
(1)制備離體蛙心標本:根據離體蛙心灌流的方法插好蛙心套管,并游離出胸腔,懸掛固定于鐵支架。
(2)用焊接有細導線的蛙心夾夾住蛙心尖部,用另一細導線置于蛙心插管的林格液內。此兩線與ZL-620輸入線相連,以記錄心電活動。
(3)安置刺激電極:剪去蛙心靜脈竇,將一對針形電極置于心室,接刺激輸出線起搏心臟。
(4)啟動ZL-620C集成化信息化信號采集處理系統。點擊ZL-620C菜單"實驗/常用生理學實驗",選擇"心肌有效不應期"。設置ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數(表2)。
(5)實驗觀察
1)改變刺激強度,找出起搏蛙心的閾強度。
2)用2倍閾強度刺激蛙心,起搏心臟,記錄起搏蛙心的心電曲線。
3)每10個左右正常起搏后,將主周期刺激的脈沖數設為2,即插入一個額外刺激,引起心室發生額外興奮。調節主周期刺激的脈沖間隔,使間隔時間逐步縮短。當間隔時間縮短到某一值時,脈沖2不再引起心室額外興奮,此間隔時間即為蛙心心室肌的有效不應期。表2???ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數表
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【注意事項】
1.?破壞蛙的腦和脊髓要完全。
2.?蛙心夾與張力換能器間的連線應有一定的緊張度。
3.?注意滴加林格液,以保持蛙心適宜的環境。
【思考題】
1.?在心臟的收縮期和舒張早期分別給予心室一個中等強度的閾上刺激,能否引起期前收縮?為什么?
2.?在期前收縮之后,為什么會出現代償間歇?在什么情況下期前收縮之后可以不出現人償間歇?
3.?心肌存在不應期的實驗依據是什么?
4.?測定心肌不應期是否必須對心臟進行人工起搏??
審核編輯:符乾江
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