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哈佛大學(xué)開發(fā)出基于ORBIT的顯微鏡

微流控 ? 來源:YXQ ? 2019-07-25 11:29 ? 次閱讀
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近日,來自哈佛大學(xué)的杰出華人教授莊小威教授課題組開發(fā)了一種基于折紙轉(zhuǎn)子的成像和跟蹤技術(shù)(origami-rotor-based imaging and tracking,ORBIT),這是一種利用熒光標記的DNA折紙轉(zhuǎn)子在單分子水平上以毫秒的時間分辨率跟蹤DNA旋轉(zhuǎn)的方法,相關(guān)研究成果發(fā)表在《Nature》上。

許多基因組加工過程(包括轉(zhuǎn)錄、復(fù)制和修復(fù))會發(fā)生DNA的旋轉(zhuǎn)。直接測量DNA旋轉(zhuǎn)的方法,如轉(zhuǎn)子珠追蹤、棱角光學(xué)捕捉器和磁鑷子等,有助于解開一系列基因組處理酶的作用機制,這些酶包括RNA聚合酶(RNA)、旋轉(zhuǎn)酶(一種病毒DNA封裝馬達)和DNA重組酶。

盡管旋轉(zhuǎn)測量有可能改變我們對基因組處理反應(yīng)的理解,但測量DNA旋轉(zhuǎn)仍然是一項艱巨的任務(wù)?,F(xiàn)有方法的時間分辨率不足以跟蹤多種酶在生理條件下誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn),且測量通量通常較低。

為了解決這些問題,研究人員開發(fā)了ORBIT技術(shù),研究人員使用ORBIT來跟蹤由RecBCD復(fù)合物(一種參與DNA修復(fù)的螺旋酶)釋放產(chǎn)生的DNA旋轉(zhuǎn),以及由RNAP轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA旋轉(zhuǎn)。研究人員描述了在RecBCD復(fù)合物誘導(dǎo)的DNA解開過程中發(fā)生的一系列事件--包括啟動、過程易位、暫停和回溯--并揭示了一個涉及可逆的不依賴ATP的DNA解開和RecB馬達參與的啟動機制。在RNAP轉(zhuǎn)錄過程中,研究人員直接觀察到單個堿基對展開相應(yīng)的旋轉(zhuǎn)步驟。

研究人員表示ORBIT將使研究蛋白質(zhì)和DNA之間廣泛的相互作用成為可能。

聲明:本文內(nèi)容及配圖由入駐作者撰寫或者入駐合作網(wǎng)站授權(quán)轉(zhuǎn)載。文章觀點僅代表作者本人,不代表電子發(fā)燒友網(wǎng)立場。文章及其配圖僅供工程師學(xué)習(xí)之用,如有內(nèi)容侵權(quán)或者其他違規(guī)問題,請聯(lián)系本站處理。 舉報投訴
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原文標題:哈佛大學(xué)開發(fā)出基于ORBIT的顯微鏡,可用于觀察DNA解螺旋

文章出處:【微信號:Micro-Fluidics,微信公眾號:微流控】歡迎添加關(guān)注!文章轉(zhuǎn)載請注明出處。

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