資料介紹
MicroRNA-122 (miRNA-122)的異常表達(dá)與肝癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移緊密相關(guān),發(fā)展簡(jiǎn)單、快速、高靈敏和高特異性的miRNA-122檢測(cè)方法對(duì)于肝癌的早期診斷和預(yù)后評(píng)估具有非常重要的意義。本文報(bào)道了一種基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)(RCA)耦合切刻內(nèi)切酶信號(hào)放大(NESA)技術(shù)的新型熒光傳感器并用于超靈敏和高選擇性檢測(cè)miRNA-122。該方法涉及了兩個(gè)階段的反應(yīng)機(jī)制,第一階段,目標(biāo)物激活切刻內(nèi)切酶輔助的聚合反應(yīng),用以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物與次級(jí)目標(biāo)物循環(huán)放大以及生成RCA引物;第二階段,利用RCA耦合NESA反應(yīng),實(shí)現(xiàn)信號(hào)傳導(dǎo)以及多重信號(hào)放大。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,該傳感器表現(xiàn)出對(duì)miRNA-122的非常高的靈敏度和特異性,檢測(cè)下限達(dá)到3.9 aM,較之前報(bào)道的方法,靈敏度有明顯的提高。另外,該方法整個(gè)過(guò)程只需一步反應(yīng),具有操作簡(jiǎn)便、成本低、檢測(cè)時(shí)間短的優(yōu)勢(shì)。所以,所提出的基于RCA耦合NESA的熒光傳感器有望建立一個(gè)簡(jiǎn)單而實(shí)用的生物傳感新平臺(tái),并應(yīng)用于miRNA檢測(cè)以及癌癥的早期診斷和預(yù)后評(píng)估。
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